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液相色譜柱常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

更新時(shí)間:2017-02-18      點(diǎn)擊次數:3054

1.液相色譜柱柱壓高    

 壓力單位換算:1bar=0.987大氣壓=14.503psi=0.1MPa=1.0197kg/cm2

 (1)新柱(未進(jìn)過(guò)樣品或只進(jìn)過(guò)柱效測試標樣)壓力高:

 以原廠(chǎng)報告上*一樣的條件下測試比較,若壓力在報告壓力值上下浮動(dòng)200-300psi以?xún)龋梢暈檎7秶蝗舾哂诔鰪S(chǎng)報告壓力值1倍或以上,有以下原因引起:

 1.~99.9%原因:系統壓力高,包括保護柱,泵,管路和接頭等引起。

 解決方案:從系統上拿掉柱子,逐步檢查具體哪個(gè)部件引起的;或者換不同的儀器平衡柱子,比較壓力值,排除柱子本身的問(wèn)題。注意:必須是平衡柱子達足夠時(shí)間后的穩定壓力值。如果您仍然不放心,可先寄回在我們公司實(shí)驗室測試。

 2.~0.1%原因:柱子本身壓力高,寄回供應方測試,如若核實(shí),可提供相關(guān)更換等處理。

 (2)使用一段時(shí)間后的舊柱壓力升高:

HPLC系統原因仍然存在,排除系統原因后,幾乎100%的原因是由于實(shí)驗過(guò)程中雜質(zhì)在柱中的累積。

 解決方案:盡量完善操作條件,做完樣品后要及時(shí)沖洗干凈,如緩沖鹽的流動(dòng)相一定要用高比例的水溶液(如90%)沖洗*后再用有機相保存。

 

2.液相色譜柱柱效低    

 (1)新柱(未進(jìn)過(guò)樣品或只進(jìn)過(guò)柱效測試標樣)柱效低:

 以原廠(chǎng)報告的條件下測試同樣的標樣,Supelco,Kromasil以及Agilent等柱子以甲苯作為比較,CNW柱子以萘作為比較,Waters柱子以苊作為比較,根據儀器不同,如果250*4.6mm,5um柱效在2000左右的差異可以認為是符合出廠(chǎng)要求的;如果您的儀器測試結果相差太大,有以下原因:

 1.~99.9%原因:系統問(wèn)題,包括接了保護柱,平衡時(shí)間不夠等引起。

 解決方案:取下保護柱(測試柱效時(shí)不能加保護柱),增加平衡時(shí)間,對于新柱,50mm長(cháng)的柱子平衡時(shí)間在30min以上,150mm的柱子在45min以上,250mm長(cháng)的柱子在75min以上。如果您不放心,可先寄回在我們公司實(shí)驗室測試。

 2.~0.1%原因:柱子本身柱效低,寄回公司檢測,如果核實(shí),可提供相關(guān)更換處理,

 (2)使用一段時(shí)間后的舊柱柱效降低:

 排除系統原因,基本是測試的條件和樣品導致,如測試條件的pH值在柱子耐受pH值范圍以外,導致柱子內填料的溶解或鍵和相流失,此外,樣品前處理不好也會(huì )使柱子很快損壞。

 

 3.液相色譜柱峰前延、拖尾等峰形不好    

 (1)柱效測試標樣峰形差:基本原因都是平衡時(shí)間不夠引起,建議您平衡時(shí)間需達到*部分我們推薦的時(shí)間。此外,還有系統原因,可建議您換一臺再測試或寄回測試。

 (2)樣品峰形差:如果柱效測試峰形很好,但是測試樣品峰形差,排除平衡時(shí)間等問(wèn)題后,基本是由于樣品性質(zhì)所引起,如一些堿性樣品會(huì )有拖尾現象,但是降低流動(dòng)相pH值會(huì )有改善。

 

4. 液相色譜柱壽命短    

 根據不同系列的柱子或不同的測試條件,壽命長(cháng)短各有不同。建議您選擇性能穩定、質(zhì)量有保證的品牌。

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