在使用液相色譜儀時(shí)為了延長(cháng)泵的使用壽命和維持其輸液的穩定性,必須按照下列注意事項進(jìn)行操作:
①防止任何固體微粒進(jìn)入泵體,因為塵埃或其它任何雜質(zhì)微粒都會(huì )磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥,因此應預先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相在玻璃容器內蒸餾,而常用的方法是濾過(guò),可采用Millipore濾膜(0.2/m或0.45/m)等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應經(jīng)常清洗或更換。
②流動(dòng)相不應含有任何腐蝕性物質(zhì),含有緩沖液的流動(dòng)相不應保留在泵內,尤其是在停泵長(cháng)時(shí)間的情況下。如果將含緩沖液的流動(dòng)相留在泵內,由于蒸發(fā)或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。因此,必須泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
③泵工作時(shí)要留心防止溶劑瓶?jì)鹊牧鲃?dòng)相被用完,否則空泵運轉也會(huì )磨損柱塞、缸體或密封環(huán),zui終產(chǎn)生漏液。
④輸液泵的工作壓力決不要超過(guò)規定的zui高壓力,否則會(huì )使高壓密封環(huán)變形,產(chǎn)生漏液。
⑤流動(dòng)相應該先脫氣,以免在泵內產(chǎn)生氣泡,影響流量的穩定性,如果有大量氣泡,泵就無(wú)法正常工作。
如果輸液泵產(chǎn)生故障,須查明原因,采取相應措施排除故障:
①沒(méi)有流動(dòng)相流出,又無(wú)壓力指示。原因可能是泵內有大量氣體,這時(shí)可打開(kāi)泄壓閥,使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉,將氣泡排盡,也可用一個(gè)50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個(gè)可能原因是密封環(huán)磨損,需更換。
②壓力和流量不穩。原因可能是氣泡,需要排除;或者是單向閥內有異物,可卸下單向閥,浸入丙酮內超聲清洗。有時(shí)可能是砂濾棒內有氣泡,或被鹽的微細晶粒或滋生的微生物部分堵塞,這時(shí),可卸下砂濾棒浸入流動(dòng)相內超聲除氣泡,或將砂濾棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)內迅速除去微生物,或將鹽溶解,再立即清洗。
③壓力過(guò)高的原因是管路被堵塞,需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏。檢查堵塞或泄漏時(shí)應逐段進(jìn)行。
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